TÉCNICA CRISPR EN EL VECTOR PARA EVITAR LA TRANSMISIÓN DE LA MALARIA

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Tipo de Edición: In vivo y germinal. La edición se realizó en embriones de mosquitos mediante microinyección de constructos CRISPR/Cas9, generando mutantes knockout transmisibles en la línea germinal.

Dirigido hacia: Mosquitos Anopheles gambiae, específicamente hacia el gen FREP1, que actúa como un agonista del parásito Plasmodium durante su paso por el intestino del mosquito

Dirigido por: CRISPR/Cas9 con ARN guía (gRNA) bajo el control de promotores U6, dirigido específicamente a secuencias del gen FREP1.

Órgano a tratar: Aunque se edita todo el genoma del mosquito, el objetivo funcional es el intestino medio y glándulas salivales, donde se da la interacción entre Plasmodium y el mosquito.

Vía de administración: Microinyección en embriones de A. gambiae con plásmidos que expresan Cas9 y gRNAs específicos, para generar mosquitos modificados genéticamente en etapa embrionaria.

Resultados a corto plazo

Reducción significativa de la infección por Plasmodium falciparum y P. berghei (hasta 100% en algunos casos). Disminución de esporozoitos en glándulas salivales. Confirmación del knockout por PCR y secuenciación. Resultados a mediano plazo Disminución en fecundidad y viabilidad de los mosquitos mutantes. Reducción en la propensión a alimentarse de sangre. Retardo en el desarrollo larvario y pupación. Resultados a largo plazo

• Posible reducción de la transmisión de malaria si los mosquitos mutantes reemplazan a poblaciones silvestres en regiones endémicas.
• Desafíos: los efectos negativos en la aptitud del mosquito podrían limitar su propagación natural.

Anexo de Búsqueda Bibliográfica

Referencia Bibliográfica

1. Dong Y, Simões ML, Marois E, Dimopoulos G. CRISPR/Cas9-Mediated Gene Knockout of Anopheles gambiae FREP1 Suppresses Malaria Parasite Infection. PLoS Pathog. 2018 Mar 15;14(3):e1006898. doi:10.1371/journal.ppat.1006898. (Link)